本指導原則由APL微波消解儀廠家提供：適用于2012年明膠藥用空心膠囊殼中鉻檢測的應急檢驗。

 

1、檢驗樣品：

 

膠囊劑（由明膠、空心膠囊殼裝載的膠囊）。

 

2、檢驗項目：

 

    明膠空心膠囊中的鉻。

 

3、檢驗方法：

 

《中國藥典》2010年版（二部）明膠空心膠囊項下鉻檢查項（P1204）、附錄IV D 原子吸收分光光度法（附錄24）、附錄I E 膠囊劑裝量差異項。

 

4、儀器

 

4.1 原子吸收分光光度計（含石墨爐原子化裝置）

 

4.2電子天平

 

4.3 微波消解儀

 

4.4 電熱板或其他趕酸設備，如：恒溫消解儀、趕酸器等。

 

5、試劑

 

5.1 硝酸（優級純）

 

5.2 鉻單元素標準溶液（1000µg/ml，國家標準物質）

 

6、空心膠囊殼的制備：

 

傾出膠囊劑的內容物，膠囊殼用棉棒或小刷試凈（不得損壞囊殼），放置，待用。

 

7、膠囊劑中明膠空心膠囊殼中總鉻測定方法：

 

7.1鉻標準貯備液的制備：取鉻單元素標準溶液（1000µg/ml），用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0μg的鉻標準貯備液。

 

7.2標準溶液的制備：分別精密量取鉻標準貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻0~80ng的對照品溶液。臨用時現配。

 

7.3供試品溶液的制備：精密稱取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐內，加硝酸5~10ml，混勻，浸泡過夜，蓋上內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解。消解*后，取消解內罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸汽揮盡并近干，用2%硝酸轉移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；同法制備試劑空白溶液，作為空白校正。

 

7.4 測定：  取供試品溶液與對照品溶液適量，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（《中國藥典》2010年版（二部）附錄IV D*法），在357.9nm的波長處測定，計算，即得。

 

8、方法驗證：

 

8.1 線性：制備含鉻的對照品溶液至少5份，濃度依次遞增，zui高濃度吸收值應在0.8以下，保證具有較好的線性范圍，相關系數（r）≥0.99。

 

8.2 準確性：應進行整個實驗過程的（包括前處理）方法學回收率驗證，暫定回收率應為80%-120%的范圍內。每次測定需進行隨行回收試驗。

 

8.3 重復性

 

取限度濃度的標準品溶液重復測定5次，吸收度（測定值）的變化范圍（RSD）不得過5%。

 

8.4 定量限

 

本方法定量限應不低于0.5mg/kg。

 

9、注意事項：

 

9.1微波消解：樣品前處理是試驗中的關鍵步驟，既要保證消解*，又要保證消解過程樣品中的鉻不損失，因此試驗中建議加入10ml硝酸（優級純），并需要浸泡過夜后消解。參考消解程序為：5min由室溫升至120℃，維持3min；6min由120℃升至150℃，維持2min；6min由150℃升至180℃，維持20min。

 

9.2為避免玻璃容器的干擾，試驗中宜采用塑料容量瓶（聚丙烯材質）定容。

 

9.3不同原子吸收儀試驗參數可能不同，可根據原子吸收儀說明書中推薦程序設    定測定參數（參考石墨爐升溫程序如下：5s升溫至100℃，保持10s；5s升溫至500℃，保持10s；0s升溫至2100℃，保持3s；0s升溫至2200℃，保持2s）

 

9.4含TiO2的膠囊殼（不透明膠囊）建議在微波消解時，樣品中除加硝酸外可另加0.5ml氫氟酸，其他同供試品溶液制備。

 

9.5實驗用水：應采用純化水，儲藏水的容器宜用聚丙烯塑料材料制成，不宜選用玻璃容器長期儲存。

 

9.6 試劑應采用優級純及以上級別試劑。

 

9.7試驗中所用容器及器皿均需在每次使用前用鹽酸溶液（濃鹽酸：水/1:1）浸泡1h，再用硝酸溶液（濃硝酸：水/1:1）浸泡1h，再用純化水沖洗干凈后使用。微波消解容器應采用儀器清洗程序清洗，不得采用鉻酸清洗液洗滌容器。

 

9.8可供選擇的鉻元素標準溶液（1000µg/mL）由國家有色金屬及電子材料分析測試中心提供（：；）；也可以由中國計量科學研究院提供（：-4703）。鉻對照貯備溶液應密封，冷暗處保存。

 

9.9 結果判斷：標準規定不得過百萬分之二（2mg/kg）。由于微量測定，結果的偏差會較大，一般兩份樣品的相對偏差≤10%，取平均值即可。

 

9.10 樣品檢測應嚴格遵守《中國藥典》2010年版（二部）“明膠空心膠囊”鉻項下方法試驗，如因試驗需要改變樣品前處理方法及檢測波長，應按照實驗室有關質量管理程序（偏離）進行。

 

9.11若試劑空白溶液測定值過高（宜不超過標準曲線zui低濃度點吸光度值的50%），應換用空白干擾小的溶液重新試驗。

 

9.12 注意試驗所需的所有儀器均應在計量檢定合格效期內。

 

9.13若供試品溶液濃度過高，可稀釋到標準曲線范圍內進行測定。

 

9.14 由于硬、軟膠囊殼中含有不同比例的甘油（軟膠囊比例較高，甘油：明膠比例可達1:2），在進行微波消解時，甘油可與硝酸產生反應，容易爆罐，請注意消解時的安全監控，盡量在前處理時預消解。

 

9.15 對本指導原則如有不清楚的地方，請

 

   中檢院包材所：

 

  孫會敏（：；）

 

  趙霞（：；）

 

  楊銳（：；）

 

   中檢院中藥所

 

       金紅宇（：；）

 

中檢院化藥所麻醉藥品室

 

       陳華（：；）

 

   中檢院器械所

 

       馮曉明（：；）

 

       王健（：；）

 

   中檢院食化所

 

       王鋼力（：；）

 

       馮克然（：；）

 

 

        葛工 （：）